最近的大流行（人類感染COVID-19，豬感染非洲豬瘟）表明，需要系統(tǒng)地收集豬群健康數(shù)據(jù)，以了解情況并指導(dǎo)有效的應(yīng)對措施。收集豬群健康數(shù)據(jù)一直是個問題，因?yàn)榕R床體征變化很大，而且個體動物的取樣/測試費(fèi)用昂貴。相比之下，基于口腔液體的監(jiān)測則簡單，準(zhǔn)確且成本低廉。

將一定長度的棉繩懸掛在豬欄中，讓豬咬/嚼繩子，然后從濕繩子中回收口腔液體，從個體豬或豬群收集口腔液體。已證明超過23種豬病原體在口腔液體中產(chǎn)生可檢測水平的核酸和/或抗體，包括最重要的疾病（例如，非洲豬瘟、經(jīng)典豬瘟病毒、口蹄疫病毒、甲型流感病毒、圓環(huán)病毒、豬流行性腹瀉和藍(lán)耳病毒）。在北美，口腔液體被廣泛用于監(jiān)測豬群，例如，愛荷華州立大學(xué)獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室在2010年至2019年間對豬口腔液體樣本進(jìn)行了約140萬次測試。

最重要的事項(xiàng)：

1. 你的長期健康目標(biāo)是什么？監(jiān)測將如何幫助你實(shí)現(xiàn)豬群的健康目標(biāo)？
2. 了解口腔液體收集過程。網(wǎng)上有很多關(guān)于口腔液體收集的視頻。

口腔液體收集：

1. 提前準(zhǔn)備。準(zhǔn)備好所需物品（繩索、刀具、樣品管等）。保持生物安全，即避免在豬舍之間運(yùn)送物資。
2. 清晨收集樣本。早晨，豬比較活躍。如果有飼喂時間表，請?jiān)陲曃骨笆占?/span>
3. 清晨收集樣本。早晨，豬比較活躍。如果有飼喂時間表，請?jiān)陲曃骨笆占?/span>
4. 取樣對象？通過收集每窩豬（母豬和仔豬）的口腔液體對斷奶前的豬進(jìn)行采樣。可從≥21日齡的仔豬（包括群飼母豬）收集單個或整個豬欄的口腔液體。可以從單獨(dú)飼養(yǎng)的公豬和母豬上收集口腔液體，但需要培訓(xùn)（請參閱#3），在大型商品系統(tǒng)中通常不實(shí)用。
5. 遵循常規(guī)。在一天的同一時間把繩子掛在同一位置以形成習(xí)慣。豬會很快學(xué)會這個過程，并且知道在隨后的取樣中該做什么。一旦建立了一個模式，收集時間可以縮短到20分鐘。不要將繩子長時間留在豬欄中（數(shù)小時），因為（a）隨著時間的推移，繩子會慢慢變干，樣品就會丟失；（b）如果停留時間過長，豬會破壞繩子；（c）豬對繩子失去興趣，會對其視而不見。
6. 避免樣品過多污染。將吊繩的底端設(shè)置在豬的肩膀高度處，以避免接觸地板。有機(jī)物質(zhì)不會直接對測試結(jié)果產(chǎn)生負(fù)面影響（RT-PCR或ELISA），但在實(shí)驗(yàn)室更容易對干凈的口腔液體進(jìn)行移液和處理。
7. 每個樣品使用一個干凈的塑料袋和塑料管。為了采集樣本，將繩子濕潤的部分放入塑料袋中，提取口腔液體，然后將樣本放入容器中（預(yù)先標(biāo)記）。收集樣品后，請取下繩索，以保持豬對繩子的新鮮感（豬也會對事物失去興趣）。
8. 保管好樣品。收集后立即放在冰上或冷藏箱中冷卻（4°C）。根據(jù)Pickett等人（2010年）的數(shù)據(jù)進(jìn)行的計(jì)算得出，PRRSV RNA在口腔液體中的半衰期為30°C下約13小時，20°C下約42小時，以及10°C以下≥14天。在30°C下約72小時后， 口腔液體中未檢測到PRRSV抗體。y was detected in oral fluids after ~72 hours at 30°C.

監(jiān)測程序:

1. 收集多少樣本，多久收集一次？做任何事都需要在預(yù)算之內(nèi)。在每個豬舍（或房間）以固定的間隔（每隔2至4周）采集幾個樣本（2至4個）也能很好地說明豬群健康史與豬群生產(chǎn)力的關(guān)系（圖1）。
2. 制定一個評估長期監(jiān)控數(shù)據(jù)的計(jì)劃。例如，統(tǒng)計(jì)過程控制圖表。
3. 在豬舍內(nèi)使用“固定空間采樣”以最大限度地檢測。關(guān)于豬舍或位點(diǎn)中“固定空間采樣”的解釋，可在線查閱：
   1. 英文版口腔液體采樣指南
   2. 西班牙語版口腔液體采樣指南
4. 期待意外。制定一個驗(yàn)證或反駁意外結(jié)果的計(jì)劃，例如，重復(fù)測試兩次，重新取樣，或使用不同的分析方法進(jìn)行測試。
5. 記錄病史來制定計(jì)劃。核酸檢測可檢測病毒的早期存在，而抗體檢測可檢測免疫反應(yīng)。這兩種技術(shù)在監(jiān)控方面的效果更好，例如，將動物從隔離區(qū)轉(zhuǎn)出。

其他考慮因素：

1. 斑馬和馬……看起來相似的事物可能有所不同。 看起來與口腔液體類似的標(biāo)本，例如口腔拭子或鼻拭子，隨著時間的推移可能無法提供相同的檢測率。 表1列出了甲型流感病毒，口蹄疫病毒，A型塞內(nèi)卡病毒和藍(lán)耳病病毒的示例。
2. 不要將收集的口腔液體樣本集中在一起，不要將在一個豬欄使用的繩子在另一個豬欄使用。這些過程不但不能提高檢測效率，反而會產(chǎn)生假陰性。
3. 避免凍融和/或極端溫度波動。口腔液體中的抗體可以耐受多次凍融循環(huán)，而核酸則不能。如果需要對一個樣品進(jìn)行多次測試，最好的方法是將樣品分成幾份，每次測試使用一份。在豬場，不要將樣本儲存在自動解凍的冰箱中，因為循環(huán)解凍可能會損壞核酸。在實(shí)驗(yàn)室中，在4°C（非室溫）下解凍口腔液體樣本可優(yōu)化PRRSV RNA的檢測（Weiser等人，2018年）。

表1：口腔液體核酸檢測與豬口腔拭子或鼻拭子的比較。

nd = 沒有數(shù)據(jù)。

基于豬欄的口腔液體樣本和個體口腔拭子評估陽性率（平均值）。數(shù)據(jù)來自Hole等人（2019年）；Pepin等人（2015年）；Romagosa等人（2012年）；Senthilkumaran等人（2017年）。

來源：pig333