鼻腔是豬群感染病毒或排毒的主要途徑之一,無論在自然感染或者人工造病的條件下,豬群都可以通過鼻腔帶毒和排毒。病毒感染的早期診斷對于豬群疫病的控制至關重要,因此開展科學、準確及可執行的監測方案勢在必行。
ASF病毒感染途徑的研究發現,鼻腔拭子的檢測比血液或其他采樣方法更早出現,同時也具有易采集、可操作性強、對豬群應激較小等優點,從而成為臨床首選。本文參考文獻報道結合臨床實際情況,對鼻腔拭子采樣做一介紹:
第一步
準備鼻拭子采樣材料:保存緩沖液、封口膠帶、一次性注射器、一次性無菌拭子、記號筆。
第二步
保定豬只,將無菌棉拭子深插入豬只鼻腔內,旋轉三次,將拭子放入保存管中,記錄豬只信息。
第三步
用無菌注射器注入2ml拭子保存緩沖液,封口,垂直放置,冷藏保存,48h內盡快送檢。
鼻拭子采樣視頻教程:
豬場內環境的樣品采集涉及到固體和液體環境,結合生產實際情況,對豬場內環境樣本采集做一介紹:
一、固體環境采樣教程
步驟一、
準備采樣材料:保存緩沖液、封口膠帶、一次性注射器、一次性無菌拭子、記號筆。
步驟二、
用無菌注射器向拭管注入2ml保存緩沖液,先浸潤無菌棉拭子。
步驟三、
固體環境采樣點表面呈井字采樣(詳見視頻),將拭子放入拭管中,記錄采樣信息;封口,垂直放置,冷藏保存,48h內盡快送檢。
二、液體環境采樣教程
步驟一、
準備采樣材料:無菌離心管、一次性無菌吸頭、保存緩沖液、封口膠帶、一次性注射器、記號筆。
步驟二、
用無菌注射器向離心管注入4ml保存緩沖液。
步驟三、
用無菌吸頭吸取采樣點液體1ml置于離心管中(詳見視頻)。封口,記錄采樣信息,冷藏保存,48h內盡快送檢。
三、豬場內環境建議采樣點
豬場內環境涉及的點和面非常多,以下建議采樣點涉及的主要是常見污染區域或者需關注的采樣點,供養殖場參考。
1、物資消毒間:物資消毒架、物資進口區域門把手、腳踏區域;
2、人員消毒通道:門把手、入口處腳踏區域;
3、獸藥房:藥房門把手、藥房冰箱門把;
4、工作服:刮取污染的工作服上污染物;
5、雨鞋:刮取雨鞋側面及鞋底的污染物;
6、內部轉運車輛:輪胎、貨倉、司機室、腳踏、方向盤、油門及剎車部位;
7、內部運輸斗車:輪胎、手推把手;
8、飼料加工成品倉出料口:出料口、環境樣品、飼料袋;
9、豬場內門把手:豬舍及獸醫室等建筑門把手;
10、道路:豬場內道路、豬舍內道路。
以上監測建議頻率為一周一次,各養殖場可根據當地疫情壓力調整監測頻率。
豬場內環境采樣
出豬臺是豬場與外界車輛直接接觸的部位,如果外面售豬車輛洗消不到位,豬場員工裝豬時,又沒有嚴格遵循嚴格的臟凈分離原則,直接將場內的豬趕到拉豬車上,就很容易將洗消不徹底的拉豬車上的病毒(包括ASFv、FMDv、PEDv等)帶入生產區,從而使豬場染上新的疫病,這也是目前豬場最容易出現問題的環節。據調查了解,ASFv通過離豬場很近的裝豬臺感染機率有85%的機會。
目前疫情緊張,在豬場外建獨立的售豬中轉站(或轉運中心),來避免ASFv的感染是最實用的辦法之一,可以有效的緩沖疫情的威脅。轉運中心可以很好避免場內工作人員與外界拉豬車輛接觸,人員即使接觸也是場內的周轉車,而場內的周轉車輛是嚴格按要求做好洗消烘干工作再來裝豬的,相對來講全場的生物安全就有了保障,因此轉運中心現在變成了規模豬場的必要設施。
轉運中心的建設,是豬場生物安全的重要一部分,而轉運中心的環境是否安全關乎豬場疫病是否發生,有案例報道,一養殖場在轉運中心監測到相關的病原菌,因洗消工作執行不到位,20天后該病原菌傳播到豬場。可見轉運中心的洗消工作和環境安全預警的重要性,洗消工作可采用低壓沖洗、清潔劑打濕浸泡、熱水高壓清洗、晾干、消毒、烘干等步驟執行,環境安全預警可定期通過實驗室(按照相關部門規定執行)監測環境評估。
轉運中心環境監測包括:外部污區、轉運灰區及內部凈區三個部分,本文結合實際情況,對轉運中心環境采樣做如下預案:
一、轉運中心采樣建議
一、采樣區域
按劃分的三個區域進行采樣,包括:外部污區、轉運灰區、內部凈區。
二、采樣示意圖
1.外部污區
選擇污區的2個區域,如圖所示。選擇區域1的左上角、右下角采樣,選擇區域2的左下角、右上角采樣。
2. 轉運灰區
選擇灰區的2個區域,如圖所示。選擇區域3的左上角、右下角采樣,選擇區域4的左下角、右上角采樣。
3. 內部凈區
選擇灰區的2個區域,如圖所示。選擇區域5的左上角、右下角采樣,選擇區域6的左下角、右上角采樣。
二、采樣示對象及方法
1.采樣對象:
所選采集區域的固體表面、或者環境液體。
2.采樣方法:
采用專用動物病毒采樣管套裝,按凈區→灰區→污區順序采樣。
(1)固體表面:使用棉拭子采樣,采用“井”字形法采樣后放入保存管中。
(2)液體環境:吸取環境中的液體0.5-1ml,放入保存管中。
3.現場監測人員要依照規范進行操作,做好現場記錄。
以上監測頻率為一周一次,各轉運中心可根據當地疫情壓力調整監測頻率。
轉運中心采樣視頻
在當前非洲豬瘟疫情嚴峻形勢下,豬場需加強生物安全體系建設,切斷病原傳播鏈條。運豬車輛在豬場與豬場之間、豬場與屠宰場之間、豬場與飼料廠之間交叉運輸的情況很常見,帶來病毒交叉傳播風險。
對于豬場來說,豬只和飼料的進出都是無法避免的,而負責運輸的載體――車輛,是當前交叉污染最突出的問題。被外部污染的車輛與豬場的接觸、流通是病毒從豬場外部進入內部的主要途徑之一。因此,提高豬場的“運輸安全系數”,使用徹底清洗、消毒和烘干的車輛非常重要。
洗消房是洗消中心的第一道防線,車輛經過徹底清潔后,車輛、洗消房內部區域環境及洗消污水的污染與否,直接反映洗消中心的安全系數。同時,當前建立的洗消中心多為區域性共用,洗消中心的安全系數關乎是否造成運輸車輛的二次污染,是否增加區域內豬場的安全風險。
洗消房的環境監測涉及到車輛、內部區域環境及污水三個部分,根據文獻結合實際情況,對洗消中心-洗消房采樣做一建議:
一、車輛采樣建議
一、采樣清單
二、采樣示意圖
(1)示意①
(2)示意②
(3)示意③
(4)示意④
二、洗消房-內部區域環境采樣建議
一、采樣區域選擇
原則:所選擇的采樣區域要具有一定的覆蓋面,越大越好。
建議:取前、中、后三個區域,具有覆蓋面,并貼合實際。
二、采樣示意圖
建議選擇3個區域進行采樣,如圖所示,包括:進入洗消間區域A、污水道表面區域B、洗消間區域C。
區域A:選擇區域A的左上角、右下角采樣。
區域B:選擇區域B的左下角、右上角采樣。
區域C:選擇區域C的左上角、右下角采樣。
三、洗消中心污水采樣建議
一、采樣建議
選擇污水道積水區域分3個點(前、中、后)采集積水。
二、采樣示意圖
以上監測建議頻率為一周一次,各洗消中心可根據當地疫情壓力調整監測評率。
洗消中心采樣建議
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